目的:探究人促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对兔骨髓来源的间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchyml Stem Cell,BMMSCs)迁移能力的影响及其中的机制。方法:利用健康6-8周龄雌性日本大耳白兔通过全骨髓培养法分离扩增兔BMMSCs,培养至第4代时进行体外成脂成骨诱导分化、流式仪检测CD29、CD44、CD45表达。P_4BMMSCs与不同浓度(0,100,200,300,1000IU/ml)EPO共孵育24h、48h后利用CCK-8检测干细胞增殖能力。设置分组,A:0IU/ml EPO孵育组;B:100IU/ml EPO孵育组;C:100IU/ml EPO+AMD3100孵育组;D:单纯AMD3100孵育组。利用划痕实验评估EPO对BMMSCs迁移能力的影响。利用Transwell小室检测各组细胞孵育24h后穿过膜的细胞数来评估EPO对BMMSCs迁移能力的影响。各组细胞孵育48h后提取总RNA及蛋白,利用q RT-PCR、Western blot方法检测SDF-1、CXCR4的m RNA及蛋白的表达水平。结果:1.第四代细胞形态呈梭形,生长排列呈现漩涡状形态。流式细胞仪检测表面标志物CD29(98.6%)、CD44(98.9%)表达量较高,CD45(0.97%)表达量较低,细胞具备体外诱导成脂成骨分化能力。2.0、100、200、300、1000IU/ml EPO孵育组24h和48h的OD450的值分别为1.283±0.036,1.374±0.022,1.344±0.025,1.335±0.027,1.182±0.018;1.727±0.041,1.827±0.029,1.789±0.033,1.737±0.029,1.574±0.027。反映在一定浓度水平,促红素能够促进BMMSCs的增殖,100IU/ml的浓度作用强(P<0.05),当促红细胞生成素浓度为1000IU/ml时抑制了BMMSCs的增殖。3.A、B、C、D四组细胞划痕实验24h后,B组划痕面积愈合明显高于对照组A(P<0.05),D组愈合率明显低于对照组A(P<0.05)。C组相较于B组创面愈合率明显下降(P<0.05)。4.A、B、C、D四组细胞Transwell实验结果各组细胞跨膜数目分别为:72±5.54,109±5.54,52.8±5.70,30.2±3.86。B组跨膜的细胞数目明显多于对照组A组(P<0.05),加入EPO后BMMSCs迁移能力增强。D组细胞迁移数目明显少于对照组A组(P<0.05),C组相较于B组细胞迁移数目明显下降(P<0.05),AMD3100能抑制EPO促进迁移的效应。5.B、C两组SDF-1 m RNA表达相较于对照组明显增加(P<0.05MC3体内实验剂量),D组SDF-1 m RNA表达低于C组(P<0.05)。B组CXCR4 m RNA表达相较于对照组明显增加(P<0.05),D组CXCR4 m RNA表达相较于对照组明显下降(P<0.05),C组CXCR4 m RNA表达相较于B组明显下降(P<0.05),D组CXCR4 m RNA表达低于C组(P<0.05)。6.B、C两组SDFTaurine临床试验-1蛋白表达相较于对照组明显增加(P<0.05),D组SDF-1蛋白表达相较于C组明显降低(P<0.05),B组CXCR4蛋白表达相较于对照组明显增加(P<0.05),D组CXCR4蛋白表达相较于对照组明显降低(P<0.05),C组CXCR4蛋白表达相较于Anaerobic biodegradationB组明显降低(P<0.05)。结论:一定浓度范围内的EPO能够促进BMMSCs增殖,EPO通过上调SDF-1、CXCR4的m RNA和蛋白的表达来调控SDF-1/CXCR4轴影响BMMSCs迁移。