目的:建立稳定可靠的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法，检测雌激素雌酮(E_1)、雌二醇(E_2)及其代谢产物2-甲氧基雌酮(2-MeOE_1)、4-甲氧基雌酮(4-MeOE_1)、2-甲氧基雌二醇(2-MeOE_2)、4-甲氧基雌二醇(4-MeOE_2)、16α-羟基雌酮(16α-OHE_1)、2-羟基雌酮(2-OHE_1)、4-羟基雌酮(4-OHE_1)、2-羟基雌二醇(2-OHE_2)、4-羟基雌二醇(4-OHE_2)共11个目标分析物的浓度水平，观察乳腺癌患者血清雌激素稳态的变化规律。方法:利用丹磺酰氯作为衍生化试剂，对待测物进行衍生化处理，采用Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以含0.1%甲酸的乙腈溶液和含0.1%甲酸的水溶液为流动相，梯度洗脱，流速0.3 mL·min~(-1),柱温为25℃,进样量30μL。质谱采用ESI离子源，多反映监测(MRM)的正离子扫描方式进行定量检测雌激素及其代谢产物共11个目标分析物(E_1、E_2、2-MeOE_1、4-MeOE_1、2-MeOE_2、4-MeOE_2、16α-OHE_1、2-OHE_1、4-OHE_1、2-OHE_2和4-OHE_2)。从特异性、线性及范围、定量限、准确度和精密度、提取回收率、基质效应和稳定性等方面对建立的分析方法进行验证。用本法对41例乳腺癌患者和25例健康志愿者的血清样本进行雌激素及其代谢产物检测，比较2组间雌激素及其代谢产物的差异。结果:LC-MS/MS法可同时检测人血清中11个HCV infection目标分析物的浓度selleck抑制剂，在标准曲线范围内线性良好；批内和批间精密度<15%;准确度绝对值<15%;提取回收率均>85%;基质效应在85%～115%;稳定性良好。用本方法进行临床血清雌激素及其代谢产物检测，测得对照组中E_1、E_2及其代谢产物2-MeOE_1、4-MeOE_1、2-MeOE_2、4-MeOE_2、16α-OHE_1、2-OHE_1/4selleck产品-OHE_1、2-OHE_2、4-OHE_2的浓度分别为(0.101±0.006)(0.170±0.012)(1.078±0.104)(0.086±0.008)(0.064±0.000)(0.115±0.051)(0.071±0.006)(0.132±0.023)(0.237±0.020)和(0.225±0.027) nmol·L~(-1),乳腺癌患者组相应的11个目标分析物的浓度分别为(0.174±0.017)(0.335±0.041)(0.958±0.080)(0.072±0.006)(0.066±0.001)(0.065±0.023)(0.097±0.007)(0.183±0.020)(0.365±0.084)和(0.366±0.082) nmol·L~(-1),结果表明乳腺癌患者原型雌激素(E_1和E_2)和羟基化雌激素(16α-OHE_1,2-OHE_2,4-OHE_2和2/4-OHE_1)的浓度显著增加，而甲氧基化雌激素(4-MeOE_2)的浓度明显降低。结论:本实验建立的血清中雌激素(E_1和E_2)及其代谢产物(2-MeOE_1、4-MeOE_1、2-MeOE_2、4-MeOE_2、16α-OHE_1、2-OHE_1、4-OHE_1、2-OHE_2和4-OHE_2)的LC-MS/MS定量检测方法准确、快速、可靠，可作为乳腺癌患者血清雌激素及其代谢产物检测的参考方法。乳腺癌状态下，雌激素稳态失衡与乳腺癌的发生发展密切相关，雌激素可能作为乳腺癌发生发展的潜在疾病标志物。